企業(yè)郵箱
搜索
科研活動
成果名稱
酶試劑活性和純度檢測技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)研究
主要完成人
譚和平、周李華、沈興中、孫登峰、葉德萍、王智、唐祥凱
所獲獎項(xiàng)
四川省科技進(jìn)步獎
獲獎等級
二等獎
授獎部門
四川省人民政府
獲獎年度
2015
承擔(dān)單位
生物所
項(xiàng)目介紹
酶試劑等科研試劑是人類基因組計劃、干細(xì)胞研究、精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)等國家重大科學(xué)計劃的基礎(chǔ)性戰(zhàn)略物質(zhì)，與科學(xué)方法、科學(xué)儀器共同被視為國家科技創(chuàng)新的三大支柱，被持續(xù)地、明確地列入國家“十一五”、“十二五”科學(xué)技術(shù)發(fā)展規(guī)劃。酶試劑活性及純度是實(shí)現(xiàn)其功能的關(guān)鍵指標(biāo)，長期以來由于缺乏科學(xué)統(tǒng)一的檢測方法和評價技術(shù)，導(dǎo)致了我國重大科學(xué)計劃受阻并依賴發(fā)達(dá)國家的嚴(yán)峻后果。在此背景下，本項(xiàng)目歷經(jīng)兩個五年計劃，在國家科技部科研試劑專項(xiàng)（2009BAK61B04、2012BAK25B01）、國家質(zhì)檢總局質(zhì)檢公益專項(xiàng)（201010212、201310240）、國家標(biāo)準(zhǔn)化項(xiàng)目等多個項(xiàng)目持續(xù)支持下，以固體復(fù)合酶（果糖二磷酸鈉（FDP）含量專用測定固體復(fù)合酶）和分子生物學(xué)工具酶（T4 DNA 連接酶、限制性內(nèi)切酶EcoRI、Taq DNA聚合酶）為研究對象，攻關(guān)了酶活性和純度檢測關(guān)鍵技術(shù)。成果主要貢獻(xiàn)如下：
（1）通過系統(tǒng)研究，優(yōu)選并確定固體復(fù)合酶活性測定的最佳測量條件，首次建立了果糖二磷酸鈉（FDP）含量專用測定固體復(fù)合酶（ALD、TIM、GDH）活性標(biāo)準(zhǔn)測量方法。
（2）利用“比較測量法”測定酶活性，顯著提高了工具酶酶活性測定結(jié)果的分辨率和準(zhǔn)確性，解決了現(xiàn)有方法不穩(wěn)定，可操作性差，測量結(jié)果無法溯源的瓶頸問題，首次建立了準(zhǔn)確可靠的T4 DNA 連接酶、限制性內(nèi)切酶EcoRI、Taq DNA聚合酶活性的標(biāo)準(zhǔn)測量方法。
（3）通過物理純度、核酸內(nèi)切酶檢測、核酸外切酶檢測、連接再切反應(yīng)檢測，首次建立了工具酶純度綜合評價指標(biāo)。采用條帶強(qiáng)度定量，建立了T4 DNA 連接酶中核酸酶、核酸內(nèi)切酶和核酸外切酶等污染物測定的標(biāo)準(zhǔn)方法，首次解決了工具酶雜質(zhì)的科學(xué)測定問題。
（4）首次研制完成了《果糖二磷酸鈉（FDP）含量測定專用檢測固體復(fù)合酶（ALD、TIM、GDH）試劑》、《T4 DNA連接酶 酶活及雜質(zhì)檢測方法》兩項(xiàng)國家標(biāo)準(zhǔn)。
